Эритроцитная масса является одним из основных компонентов крови, который получается из цельной консервированной крови, путем центрифугирования и дальнейшего ликвидирования плазмы, а также лейкоцитов и тромбоцитов.

В состав эритроцитной массы входят непосредственно эритроциты, а именно 70-80 процентов от общей массы, плазма, которая составляет 20-30% и примесь лейкоцитов и тромбоцитов. Если сравнивать содержание эритроцитов в одной дозе эритроцитной массы (270 ± 20 мл) то эквивалент к одной дозе крови составит 510 мл. Гематокрит эритроцитной массы напрямую зависит от первоначальных гематологических данных донора, и составляет в среднем 65-80%. Помимо этого на гематокрит влияют такие параметры, как консервирующий раствор и метод получения эритроцитной массы.

С целью улучшения реологических свойств эритроцитной массы непосредственно перед трансфузией в контейнер с кровью добавляют 50-100 мл 0,9 %-ного раствора хлорида натрия.

В основном эритроцитная масса используется при компонентной гемотерапии анемических состояний. Если сравнить эритроцитную массу с цельной кровью, то получится, что ЭМ содержит одинаковое количество эритроцитов, гемоглобина и намного меньше цитрата, лейкоцитов, тромбоцитов, а также продуктов распада. При этом объем эритроцитной массы с вышеперечисленным содержанием намного меньше, чем объем цельной крови. Лечебные свойства эритроцитной массы эквивалентны эритроцитам консервированной крови. С целью правильного хранения эритроцитную массу рекомендуется хранить при температуре от + 4 до + 6 градусов по Цельсию. Донорская кровь отличается по внешнему виду от эритроцитной массы. Так ЭМ обладает меньшим объемом плазмы над слоем клеток, выпавших в осадок.

Срок хранения эритроцитной массы, законсервированной на CPD, составляет двадцать один день, а на консерванте CPDA-I - тридцать пять дней.

По необходимости в эритроцитную массу могут добавить тромбоциты и лейкоциты. По истечении восьми, десяти дней в эритроцитной массе может быть обнаружен незначительный гемолиз. Данное образование не является противопоказанием по применению эритроцитной массы в медицинских целях.

Чаще всего эритроцитная масса назначается для купирования анемии и усиления оксигенирующей функции крови.

Эритроцитная масса не применяется в случае, если кровопотери больного составляют от 10 до 15%, а также уровень гематокрита, гемоглобина и белков плазмы находится в норме. С целью возместить кровопотери и для поддержания стабильной гемодинамики таким пациентам необходимо ввести кровезаменители.

В случае если кровопотери составляют более 15-ти -20-ти процентов у пациента наблюдаются первичные признаки нарушения кислородтранспортной функции крови, что означает необходимость применения эритроцитной массы. Эритроцитную массу не применяют при остром септическом эндокардите, прогрессирующем развитии диффузного гломерулонефрита, хронической почечной, хронической и острой печеночной недостаточности, декомпенсации кровообращения, пороках сердца в стадии декомпенсации, остром ревматизме, гипертонической болезни Зет.

На практике используются три метода разделения цельной консервированной крови на компоненты:
центрифугирование крови (например, 1500-2500 об/мин в течение 20-25 минут);
фильтрация крови через специальные устройства или колонки;
спонтанное осаждение форменных элементов (хранение при 4 °С 20-24ч).

Методами фракционирования из цельной консервированной крови можно получить:
плазму;
эритроциты;
лейкоциты;
тромбоциты и
стволовые клетки периферической крови (на автоматических сепараторах крови).

Эритроцитная масса (ЭМ)

Эритроцитная масса - один из основных компонентов крови, получаемый из цельной консервированной крови методом центрифугирования и последующего удаления плазмы, лейкоцитов и тромбоцитов.

Эритроцитная масса состоит из эритроцитов (70-80 %) и плазмы (20-30 %) с примесью лейкоцитов и тромбоцитов. По содержанию эритроцитов одна доза эритроцитной массы (270 ± 20 мл) эквивалентна одной дозе (510 мл) крови. Гематокрит ЭМ составляет 65-80 % в зависимости от первоначальных гематологических параметров донора, консервирующего раствора и метода получения эритроцитной массы.

Для улучшения реологических свойств эритроцитной массы непосредственно перед трансфузией допускается добавление в контейнер 50-100 мл 0,9 %-ного раствора натрия хлорида.
Компонентная гемотерапия анемических состояний базируется на преимущественном применении эритроцитной массы. ЭМ, в сравнении с цельной кровью, в меньшем объеме содержит то же количество эритроцитов, гемоглобина и значительно (в 3-4 раза) меньше цитрата, тромбоцитов, лейкоцитов, продуктов распада, антигенов белков плазмы и антител. По своим лечебным свойствам ЭМ равноценна эритроцитам консервированной крови.

Условия хранения эритроцитарной массы

ЭМ хранится при температуре +4-6 С.
ЭМ по внешнему виду отличается от донорской крови тем, что имеет меньший объем плазмы (20-30 %) над слоем осевших клеток.
ЭМ из крови, заготовленной на консерванте CPD, имеет срок хранения 21 день, а на консерванте CPDA-I - 35 дней.
В ЭМ могут быть примеси тромбоцитов и лейкоцитов.
В ЭМ 8- 10-дневного хранения может обнаружиться незначительный гемолиз, который не является противопоказанием для ее клинического использования.

Преимущества эритроцитарной массы по сравнению с цельной консервированной кровью:
более высокая кислородтранспортная емкость в меньшем объеме продукта;
минимальное содержание иммуногенных факторов - белков плазмы, лейкоцитов, тромбоцитов;
низкое содержание продуктов распада клеток и белков плазмы;
низкое содержание вазоактивных веществ - серотонина, гистамина, натрия, калия, аммония и др.;
низкое содержание микроагрегатов;
низкое содержание факторов гемокоагуляции;
низкое содержание консервирующего раствора;
возможность приготовления отмытых эритроцитов (имеет принципиально важное значение для больных, сенсибилизированных антигенами лейкоцитов, тромбоцитов и белков плазмы);
возможность разведения ЭМ необходимыми трансфузионными средами (желатинолем, модежелем, гелофузином и др.).

Эритроцитная масса назначают с целью купирования анемии для усиления оксигенирующей функции крови. Гемотрансфузия ЭМ должна осуществляться не только на основании показателей гематокрита, гемоглобина и количества эритроцитов, но и с учетом клинического состояния пациента.

У больных с нормальными исходными показателями гемоглобина , гематокрита и белков плазмы при кровопотере в пределах 10-15 % ОЦК нет необходимости в применении ЭМ. Для поддержания стабильной гемодинамики и возмещения кровопотери достаточно кровезаменителей.

При кровопотере более 15-20 % ОЦК, как правило, наблюдаются первые признаки нарушения кислородтранспортной функции крови, что требует адекватного восполнения дефицита эритроцитов, т. е. применения ЭМ.

Применение эритроцитной массы значительно снижает вероятность иммунизации больного белками плазмы, лейкоцитами и тромбоцитами донорской крови и позволяет значительно снизить неспецифические трансфузионные конфликты при хирургических операциях.

Появление в этот период даже одного из таких клинических симптомов ка озноб, боли в пояснице, чувство жара и стеснения в груди, головной боли, тошноты или рвоты, требует немедленного прекращения трансфузии и отказа от переливания данной трансфузионной среды!

Экстренность трансфузии компонентов крови не освобождает от выполнения биологической пробы! Во время ее проведения возможно продолжение переливания солевых растворов.

Необходимо еще раз отметить, что контрольная проверка групповой принадлежности реципиента и донора по системам АВО и резус, а также проба на индивидуальную совместимость проводятся врачом непосредственно у постели реципиента или в операционной. Врач, который проводит трансфузию несет ответственность за ее результат!

ЗАПРЕЩЕНО введение в контейнер с компонентом крови каких – либо других медикаментов или растворов, кроме 0,9% стерильного изотонического раствора хлорида натрия!!!

Переливание компонентов крови из одного контейнера нескольким реципиентам З А П Р Е Щ А Е Т С Я!!!

2.5. МЕРОПРИЯТИЯ, ПРОВОДИМЫЕ ПОСЛЕ ПЕРЕЛИВАНИЯ ГТС.

После окончания переливания донорский контейнер с небольшим количеством оставшейся ГТС и пробирка с кровью реципиента, использованная для проведения проб на индивидуальную совместимость, подлежит обязательному сохранению в течение 48 часов в холодильнике!!!

Реципиент после переливания соблюдает в течение 2 часов постельный режим и наблюдается лечащим или дежурным врачом: в течение 3 часов ему измеряют температуру тела, АД, фиксируя эти показатели в протоколе переливания. Контролируется почасовой объем мочеотделения и цвет мочи: появление красной окраски мочи при сохранении прозрачности свидетельствует обостром гемолизе!!!

На следующий день после переливания обязательно производят клинический анализ крови и мочи.

Каждую операцию переливания крови, ее компонентов и препаратов регистрируют в «Книге учета переливания гемотрансфузионных средств и кровезамещающих растворов», которая должна быть в каждом лечебном отделении!!!

III. УКАЗАНИЯ МЕДИЦИНСКИМ СЕСТРАМ ПО ПЕРЕЛИВАНИЮ КОМПОНЕНТОВ И ПРЕПАРАТОВ КРОВИ.

К переливанию компонентов и препаратов крови, под руководством врача, допускается средний медицинский персонал, подготовленный теоретически и практически по вопросам гемотрансфузионной терапии и сдавший зачет начальнику отделения.

Медицинская сестра, участвующая в переливании ГТС, обязана:

Заказывать необходимые ГТС на основании требований, подписанных лечащим врачом и начальником отделения;

Получать на СПК госпиталя компоненты и препараты крови, правильно их транспортировать в отделение и хранить до использования;

По распоряжению врача подготовить все необходимое для проведения гемотрансфузии;

Уметь определять группу крови при помощи моноклональных сывороток «Цоликлон» анти – А и анти – В;

В течение суток в после преливани ГТС вести за реципиентом наблюдение и проводить в первые 3 часа после трансфузии мониторинг температуры тела, пульса, артериального давления с внесением этих показателей в протокол переливания;

Знать клинику посттрансфузионных реакций и осложнений, а также неотложные лечебные мероприятия при их возникновении;

Вести учетную документацию по переливанию ГТС в отделении;

При возникновении каких – либо сомнений в пригодности ГТС, подозрении на развитие посттрансфузионной реакции (осложнения), а также при ухудшении самочувствияи состояния больного, Н Е М Е Д Л Е Н Н О доложить врачу!!!

IV. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМОТРАНСФУЗИОННЫХ СРЕДСТВ.

Эритроцитная масса – основная гемотрансфузионная среда, гематокрит которой не выше 80%. Получают эритроцитную массу из консервированной крови путем отделения плазмы. Переливание эритроцитной массы является методом выбора для восстановления кислородтранспортной функции крови. По сравнению с цельной кровью эритроцитная масса в меньшем объеме содержит тоже количество эритроцитов, но меньше цитрата, продуктов распада клеток, клеточных и белковых антигенов и антител. Стандартная эритроцитная масса хранится при температуре + 4…+ 2 град. С. Сроки хранения определяются составм консервирующего раствора для крови, из которой она получена: Глюгицир или Цитроглюкофосфат – 21 день, CPDA – 35 дней.

Эритроцитная масса с удаленным лейкотромбослоем – гемоком-

понент, при приготовлении которого после центрифугирования из эритромассы удаляется плазма и 20 – 60 мл поверхностного слоя клеток (лейкоциты и тромбоциты). Эта ГТС необходима при проведении заместительной терапии у много рожавших женщин, у лиц с отягощенным трансфузиологическим намнезом, у которых могут быть выявлены антитела к лейкоцитам и (или) тромбоцитам.

Эритроцитная взвесь – при приготовлении этой ГТС после центрифугирования консервированной крови удаляется плазма и к эритроцитам добавляется взвешивающий (ресуспендирующий) раствор, обеспечивающий лучшую сохранность клеток и реологические свойства эритромассы. Срок хранения определяется составом ресуспендирующего раствора: 0,9% физиологический раствор натрия хлорида – 24 часа при температуре + 4 град.С;

SAGM – 41 день.

- готовится из консервированной крови посредством центрифугирования, удаления плазмы и отмывания эритроцитов изотоническим раствором. Срок хранения: при комнатной температуре – 6 часов; при температуре + 2…+ 6 град.С – 24 часа.

Эритроцитная масса фильтрованная – производится с использованием лейкоцитарных фильтров. Срок ее хранения определяется протоколом фильтрации.

Эритроцитная взвесь размороженная и отмытая – взвесь эрит- роцитов, сохраняемых непрерывно в замороженном состоянии при заданных температурных режимах в присутствии ограждающего раствора, который удаляется после размораживания с помощью процедуры отмывания. Она представляет собой идеальную форму для хранения редких гупп крови, для длительного (годами) хранения компонентов крови с целью аутотрансфузии. Содержит меньшее количество лейкоцитов, тромбоцитов и плазмы по сравнению с другими эритроцитсодержащими ГТС. Должна быть использована в течение 24 часов после размораживания и отмывания.

Коцентрат тромбоцитов (тромбоконцентрат) – суспензия жизнеспособных и гемостатически активных тромбоцитов в плазме, полученная путем серийного центрифугирования дозы конс. Крови, дискретным аферезом или автоматическим тромбоцитаферезом. Тромбоконцентрат должен быть совместим по антигенам АВО и резус с реципиентом. Перед его переливанием врач должен тщательно проверить маркировку контейнера, его герметичность, сверить идентичность группы и резус – фактора донора и реципиента. Срок хранения тромбоконцентрата – до 5 суток при температуре + 20…+ 24 град.С и непрерывном, нетрвмирующем клетки, автоматическом помешивав помешивании.

Лейкоцитный концентрат – готовится, как правило, путем аппаратного цитафереза и содержит 10 – 20 тыс. лейкоцитов. Используется при снижении их в крови реципиента до 0,5 тыс. на фоне локальной или генерализованной инфекции. Перед переливанием лейкоконцентрата проводится обязательное тестирование , аналогичное таковому при переливанииэритроцитов (АВО и резус – фактор). Совместимость по HLA антигенам обеспечивает лучший ответ на трансфузию, особенно у больных с выявленными антителами системы HLA. Переливание лейкоконцентрата проводится внутривенно капельно, сразу же после заготовки. Как исключение, допускается хранение до 24 часов при температуре + 20…+ 24 град.С.

Свежезамороженная плазма (СЗП) – плазма, в течение 6 часов после эксфузии отделенная от эритроцитов и замороженная до температуры - 30 град.С за один час. Такой режим заготовки и температура хранения обеспечивают ее длительное (до 2 лет) хранение. В ней в оптимальном соотношении сохраняются лабильные (V,VIII) и стабильные (I, II, VII, IX) факторы свертывания. Непосредственно перед переливанием СЗП оттаивают в водяной бане при + 37 град.С. После оттаивания в ней могут появиться хлопья фибрина, что не препятствует ее использованию с помощью стандартных устройств для внутривенного переливания с фильтром.

Перед переливанием необходимо определить группу крови и резус – принадлежность реципиента. Групповую и резус – принадлежность донора устанавливают по этикетке на контейнере.

Проба на индивидуальную совместимость не проводится. Преливаемая плазма должна быть одной группы с реципиентом по системе АВО; по системе резус совместимость необязательна, т.к. СЗП является беклеточной средой, однако при объемных (более 1 литра) переливаниях СЗП резус – совместимость необходима.

Обязательно, перед переливанием СЗП, проводится биологическая проба!!!

Размороженная плазма может сохраняться до переливания не более 1 часа!

Криопреципитат – концентрированная смесь плазменных факторов свертывания, полученная из СЗП методом криопреципитации. В небольшом объеме данного компонента содержатся VIII фактор и фибриноген в высокой концентрации. Все тестирования криопреципитата и способ размораживания перед переливанием аналогичны таковым при работе с СЗП. Оттаявший криопреципитат должен быть прозрачным, желтоватого цвета, без сгустков и хлопьев, и прелит не позднее 4 часов при условии его хранения при комнатной температуре.

Плазма иммунная – плазма, содержащая антитела против стафилококка (антистафилококковая плазма), протея (противопротейная плазма), против синегнойной палочки (антисинегнойная) и др. Показана при лечении или профилактики гнойно – септических осложнений, вызываемых соответствующим бактериальным агентом.

ПРИМЕЧАНИЕ. Перед инфузией таких кровезаменителей, как:

ПОЛИГЛЮКИН. РЕОПОЛИГЛЮКИН,

ПЕРФТОРАН, а также их аналогов,

обязательно проведение биологической пробы!!!

Инструкция составлена на основании следующих документов:

1. Руководство по военной трансфузиологии. / Утверждено начальником

ГВМУ МО РФ / Москва, 2005 г.

2. Приказ МЗ РФ № 363 от 25.11.2002 г. «Об утверждении Инструкции по

переливанию компонентов крови».

3. Руководство по инфузионно – трансфузионной терапии. / Рагимов А.А.,

Щербакова Г.Н. – М.: ООО «Медицинское информационное агенство»,

Владельцы патента RU 2495568:

Изобретение относится к медицине. Проводят получение донорской крови, смешивание с гемоконсервантом глюцир в соотношении 4:1, разделение донорской крови на плазму и эритроцитную массу с последующим хранением эритроцитной массы в течение 30 суток при t=+4°С. Дополнительно в состав гемоконсерванта вводят 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малат. Изобретение позволяет повысить эффективность защиты клеточных мембран эритроцитов, ограничить процесс гемолиза, предупредить образование микросгустков на поздних сроках хранения эритроцитарной массы. 1 з.п. ф-лы, 6 табл., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно, к фармакологии и трансфузиологии, и может быть использовано для консервирования эритроцитарной массы и хранения донорских эритроцитов до 30 суток при t=+4°С.

Консервирование донорской крови и эритроцитарной массы проводится с использованием гемоконсервантов и дополнительных веществ, способствующих укреплению клеточной мембраны эритроцитов, в качестве которых используются вещества, уплотняющие мембрану и частично обезвоживающие ее (сахароза, маннит, сорбит), а также коллоидные препараты (растворы желатина, поливинилпирролидона), которые, обволакивая эритроцитную мембрану, повышают ее стабильность при консервировании (Шевченко Ю.Л., Шабалин В.Н., Заривчатский М.Ф., Селиванов Е.А. «Руководство по общей и клинической трансфузиологии.» - Спб: ООО «Фолиант», 2003, с.127-128.).

Недостатком существующего способа является значительное снижение эффективности: отсутствие влияния на процессы перекисного окисления липидов и образование свободных радикалов при хранении донорских эритроцитов, что неизбежно приводит к ускоренному старению клеток.

Также известен способ консервирования донорской крови путем дополнительного введения 3-окси-6-метил-2-этилпиридина сукцината (мексидола, далее ОПС) в состав стандартного гемокон-серванта глюгицир в концентрации 0,25 мг/мл глюгицира. При этом консервант содержит в 1 литре воды натрия гидроцитрат двузаме-щенный 20 г, глюкозы безводной 30 г, а также дополнительно ОПС 0,25 г. Соотношение крови и консерванта 4:1 (Патент РФ №2410103).

Недостатком данного способа, несмотря на успешную коррекцию процессов перекисного окисления липидов в донорской крови и повышение ее качества по сравнению с кровью, консервированной только с использованием глюгицира, является снижение защитной активности заявленной комбинации глюгицира ОПС к 14-ым, 21-ым и 30-ым суткам хранения донорской крови.

Целью изобретения является более эффективная защита клеточных мембран эритроцитов, в большей степени ограничение процессов гемолиза и предупреждение образование микросгустков на поздних сроках хранения эритроцитарной массы (14-21-30 сутки).

Поставленная цель решается дополнительным введением 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малата (этоксидола, далее ОПМ) в состав гемоконсерванта глюгицир в концентрации 0,25 мг/мл глюгицира. Консервант содержит в 1 литре воды натрия гидроцитрат двузамещенный 20 г, глюкозы безводной 30 г, ОПМ 25 г. Соотношение крови и консерванта 4:1.

Технический результат заключается в повышении качества эритроцитарной массы при ее хранении до 14-21-30 суток. Консервант позволяет сохранить морфофункциональную полноценность эритроцитов в течение 30 суток.

Изобретение иллюстрируются следующими примерами.

Исследование влияния ОПМ проводилось в образцах эритро-цитной массы, заготовленной на гемоконсерванте глюгицир, который содержал 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл ОПМ.

Контролем служила эритроцитарная масса, заготовленная на глюгицире без добавок.

Серией сравнения явились образцы донорской эритроцитарной массы, заготовленной на гемоконсерванте глюгицир, который содержал 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл ОПС.

Исследования ряда показателей, отражающих качество эритроцитов, проводили в образцах эритроцитарной массы сразу после заготовки, затем, в процессе хранения при t=+4°С через 7 суток, 14 суток, 21 сутки и 30 суток.

Влияние ОПМ на морфо-функциональную полноценность донорских эритроцитов исследовали путем определения содержания свободного гемоглобина бензидиновым методом, доли осмотически неустойчивых эритроцитов (по содержанию свободного гемоглобина после помещения эритроцитов в 0,6% раствор натрия хлорида), количества микросгустков (подсчет под микроскопом), определяли процент гемолиза, среднего объема эритроцита (MCV) и ширины распределения эритроцитов (анизоцитоз) на гематологическом анализаторе МЕК-6410К (Япония).

Хранение донорской эритроцитной массы сопровождается увеличением проницаемости клеточной мембраны, ростом осмотической неустойчивости эритроцитов и увеличением содержания свободного гемоглобина, нарастанием количества микросгустков.

На сроках хранения свыше 7 суток в образцах эритроцитарной массы с добавлением ОПМ наблюдалось достоверно более значительное снижение количества микросгустков во всех изученных дозах (0,25 мг/мл, 0,5 и 1,0 мг/мл глюгицира), чем при добавлении к глюгициру ОПС. Так, при использовании препарата в концентрации 0,25 мг/мл показатель снижался относительно данных контроля на 14-е сутки 48%, на 21-е сутки - 47% и на 30-е сутки хранения - на 50% и был меньше серии сравнения, соответственно, на 41%, 31% и 34%.

При использовании для добавления к глюгициру ОПМ в концентрации 0,5 мг/мл количество микросгустков в образцах эритроцитарной массы снижалось по сравнению с контролем к 14-м суткам на 41%, к 21-м - на 47% и к 30-м - на 52%, в том числе, по сравнению с показателями серии сравнения (с применением ОПС в соответствующей концентрации), на 33%, 30% и 46%, соответственно.

ОПМ в концентрации 1,0 мг/мл позволило ограничить рост количества микросгустков на 14-е, 21-е и 30-е сутки хранения на 41%, 34% и 47%, соответственно, по сравнению с контрольными данными. Кроме того, показатель был ниже серии сравнения на 34%, 14% и 41%.

Минимальное содержание микросгустков определялось в образцах с добавлением ОПМ в концентрации 0,5 мг/мл. Динамические изменения гематологических показателей эритроцитов, свидетельствуют о целесообразности применения ОПМ при консервировании эритроцитарной массы (табл.1).

Уровень свободного гемоглобина на 7-е сутки хранения донорской эритроцитарной массы на фоне добавления к консерванту ОПМ в концентрации 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл был ниже контрольных данных на 24%, 33% и 22%, соответственно, и достоверно не отличался от показателей группы сравнения с добавлением ОПС (табл.2).

К 14 суткам хранения эритроцитарной массы в образцах с добавлением к консерванту ОПМ уровень свободного гемоглобина был меньше контрольных данных на 20%, 42% и 27%. При этом в группе сравнения, где к консерванту глюгицир добавлялся ОПС в соответствующих дозах, достоверного снижения содержания свободного гемоглобина не наблюдалось (табл.2).

На 21 сутки хранения эритроцитарной массы с добавлением к консерванту глюгицир ОПМ уровень свободного гемоглобина был ниже показателей контроля на 58%, 69% и 61%, в то время как в серии сравнения с добавлением ОПС показатель снижался относительно контроля только при использовании концентрации 0,25 мг/мл на 34% (табл.2).

К 30-м суткам хранения донорской эритроцитарной массы наибольшее снижение уровня свободного гемоглобина наблюдалось при использовании концентрации ОПМ 0,5 мг/мл.

Процент гемолиза в образцах донорской эритроцитарной массы снижался при добавлении ОПМ к консерванту глюгицир к 7 суткам хранения по сравнению с контролем на 52%, 69% и 70%, соответственно, при использовании концентрации ОПМ 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл. При этом показатель во всех исследованных концентрациях снижался достоверно в большей степени, чем при добавлении к глюгициру ОПС.

На 14 сутки хранения процент гемолиза также был ниже контроля на 64%, 69% и 63% при использовании концентрации ОПМ 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл, соответственно, и был достоверно меньше данных серии сравнения, где добавлялся ОПС, на 59%, 65% и 61%.

На 21 сутки хранения эритроцитарной массы процент гемолиза был ниже контрольных данных на 49% и 22% в образцах с использованием концентрации ОПМ 0,5 и 1,0 мг/мл. При этом более выраженное снижение процента гемолиза по сравнению с добавлением в консервант ОПС наблюдалось при использовании концентрации ОПМ 0,5 мг/мл (на 56%).

На 30-е сутки хранения эритроцитарной массы процент гемолиза был ниже контрольных данных на 46%, 58% и 48% в образцах с добавлением к консерванту ОПМ в концентрации 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл. Причем, при использовании концентрации 0,5 мг/мл показатель был ниже данных группы сравнения на 19%.

Таким образом, процент гемолиза снижался в большей степени при различных сроках хранения эритроцитарной массы в образцах, где к консерванту глюгицир добавлялся ОПМ в концентрации 0,5 мг/мл.

Доля осмотически неустойчивых эритроцитов снижалась по сравнению с контролем на всех сроках наблюдения при добавлении к консерванту глюгицир ОПМ в изученных концентрациях (табл.4). При этом при добавлении ОПМ в концентрации 0,5 мг/мл показатель не отличался от данных серии сравнения, а в концентрации 1,0 мг/мл был ниже, чем при добавлении ОПС на 32%, 7% и 17% на сроках хранения 14, 21 и 30 суток.

На всех сроках хранения эритроцитарной массы при добавлении к консерванту глюгицир ОПМ в изученных концентрациях наблюдается уменьшение процессов анизоцитоза (табл.5) и ограничение роста объема эритроцитов (табл.6). При этом предотвращается увеличение ширины распределения размеров эритроцитов и их объема свыше нормы при хранении образцов донорской эритроцитарной массы до 30 суток, в то время как в контроле в 80% случаев на поздних сроках хранения наблюдается увеличение размеров эритроцитов.

Дополнительное применение 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малата в составе гемоконсерванта «глюгицир» позволяет пролонгировать сроки хранения донорских эритроцитов и снизить уровень деструктивных процессов в хранящейся до востребования эритроцитной массе.

1. Способ консервирования донорской эритроцитарной массы, включающий получение донорской крови, смешивание с гемоконсервантом в соотношении 4:1, разделение донорской крови на плазму и эритроцитную массу, с последующим хранением эритроцитной массы в течение 30 суток при t=+4°С, отличающийся тем, что дополнительно в состав гемоконсерванта глюгицир вводят 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малат.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малат вводят в концентрации 0,5 или 1,0 мг/мл глюгицира.

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу получения минерализованного костного матрикса. Способ получения минерализованного костного матрикса, включающий механическую очистку губчатой кости от хрящевой ткани, перфорацию кости спицей, далее кость последовательно обрабатывают раствором натрия хлорида и твина-100, раствором перекиси водорода, смесью хлороформ-этанол, перемешивают, объем всех используемых растворов составляет не менее 5 объемов губчатой кости, далее обрабатывают спирт-эфирной смесью, перемешивают, все перемешивания проводят на магнитной мешалке, далее центрифугируют и проветривают на воздухе, затем костные фрагменты замораживают, лиофильно высушивают и стерилизуют, при определенных условиях.

Изобретение относится к области медицины, а именно инфектологии и патологической анатомии, и может быть использовано для диагностики телэнцефального глиоза (ТГ) у детей с врожденными инфекциями.

Изобретение относится к области криобиологии, клеточной биологии, морской биотехнологии и гидробиологии. Проводят обработку клеток морских микроводорослей криопротекторной смесью, содержащей проникающий и непроникающий криопротекторы и питательную среду. Осуществляют замораживание с последующим сохранением в жидком азоте. В качестве питательной среды берут стерильную морскую воду при следующем соотношении компонентов, в масс.%: проникающий криопротектор 5-7,5%; непроникающий криопротектор 1,5-3%; стерильная морская вода - остальное. Перед замораживанием проводят инкубацию клеток морских микроводорослей на ледяной бане в течение не менее 10 минут. Замораживание ведут в три этапа: сначала охлаждают до -25°C со скоростью 0,9-1,1°C/мин; затем охлаждают до -75°C со скоростью 2-2,5°C/мин; после чего охлаждают до -196°C, помещая клетки морских микроводорослей в жидкий азот. В качестве проникающего криопротектора можно использовать диметилсульфоксид (ДМСО) или этиленгликоль. В качестве непроникающего криопротектора - трегалозу или поливинилпирролидон (ПВП). Изобретение позволяет повысить выход жизнеспособных, функционально активных клеток микроводорослей после замораживания-оттаивания и восстановить их культуру в течение недели после криоконсервации, обеспечивая при этом возможность количественной оценки функционального состояния микроводорослей. 2 з.п. ф-лы, 1 ил., 3 табл., 5 пр.

Изобретение относится к офтальмологии. Раствор для хранения роговицы содержит смесь биологических сред M199 и DMEM, хондроитина сульфат, L-аланил-L-глутамин, 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновую кислоту (HEPES), пируват натрия, β-гидроксибутират натрия, гентамицина сульфат, амфотерицин В, 2,3,5,7,8-пентагидрокси-6-этилнафталиндион-1,4 (эхинохром А) и гидроксиэтилкрахмал при следующем соотношении компонентов, мас.%: среда M199 0,64; среда DMEM 0,447; гидроксиэтилкрахмал 5-10; хондроитина сульфат 2,5; эхинохром А 0,001-0,01; L-аланил-L-глутамин 0,05425; буфер HEPES 0,5958; пируват натрия 0,0055; β-гидроксибутират натрия 0,151; гентамицина сульфат 0,01; амфотерицин В 0,0000250; дистиллированная вода до 100. Изобретение позволяет увеличить срок хранения роговицы. 1 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, ветеринарии и биологии. Проводят фиксацию образца, декальцинацию, промывание водой, дегидратацию в спиртовых растворах и заливку в парафин. Фиксацию образца проводят в течение 24-х часов в молекулярном фиксаторе FineFix на спиртовой основе, содержащем FineFix и 96° спирт в соотношении 1:2,5. Декальцинацию осуществляют в течение 2-5 суток в 5-8% забуференном растворе муравьиной кислоты при ежедневной смене декальцинирующего раствора и контроле полноты декальцинации. Соотношение образец: декальцинирующий раствор составляет 1:20. После завершения декальцинации проводят промывку образца водой и до стадии дегидратации повторно помещают образец в спиртовой раствор молекулярного фиксатора FineFix на 6-12 часов. Набор для приготовления препарата костной ткани содержит молекулярный фиксатор FineFix на спиртовой основе, концентрированный раствор декальцинатора, изготовленный из расчета 40 г лимоннокислого натрия, 100 мл 90%-ного раствора муравьиной кислоты, 300 мл дистиллированной воды и рабочие растворы для контроля полноты декальцинации, содержащие насыщенный раствор оксалата аммония и 25%-ный водный раствор аммиака. Изобретение позволяет получать высококачественные препараты, пригодные для последующего гистологического и иммуногистологического исследования при отсутствии использования высокотоксичных компонентов. 2 н.п. ф-лы, 2 ил.

Единица дозирования в форме прессованной таблетки для замедленного высвобождения средства против насекомых содержит испаряющееся средство против насекомых и инертную твердую основу. Твердая основа содержит двухкомпонентную систему, включающую материал для придания объема и материал, обеспечивающий пористость. Материал для придания объема выбран из группы наполнителей прямого прессования. Материал, обеспечивающий пористость, является карбонатом или бикарбонатом. Устройство подачи средства против насекомых содержит емкость для средства против насекомых. Для получения единицы дозирования ингредиенты смешивают и таблетируют при температуре выше температуры плавления средства против насекомых. Дозатор средства против насекомых содержит единицу дозирования в качестве единственного источника средства против насекомых. Состав находится в форме таблетки, помещенной рядом с нагревателем. Устройство содержит вилку, которая обеспечивает электрическое соединение с нагревателем, и колпак для таблетки, содержащий кожух и крышку. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 пр.

Устройство для консервирования замораживанием клеточных взвесей под давлением в атмосфере инертного газа - портативный криобароконтейнер - выполнен из нержавеющей стали марки 12Х18Н10Е и состоит из передней и задней панелей. На передней панели расположено восемь отверстий для стяжных болтов, а в верхней части имеется винт с толкателем для пережатия трубки пластикового контейнера, через которую заливается клеточная взвесь и подается под давлением инертный газ в стандартный контейнер «Компопласт 300». Контейнер находится в криобароконтейнере, а на задней панели в центральной части расположена ниша, выполненная точно по объему и размерам стандартного пластикового контейнера, а в верхней части имеется канал, по которому проходит трубка от него, а в верхней и нижней частях ниши находятся возвышения. Сверху задней панели расположена петля для подвешивания всего устройства, а по всему периметру задней панели расположено восемь стяжных болтов, закрепленных винтовой нарезкой и сваркой в задней панели. С задней стороны задней панели присоединена основными восьмью стяжными болтами и монтажными винтами задняя стенка. Использование данного изобретения позволяет производить замораживание по различным программам. 2 ил.

Изобретение относится к упаковке для вмещения и хранения жидкого вещества, предназначенного для замораживания. Упаковка (1) для вмещения и хранения жидкого вещества (S), предназначенного для замораживания, содержит две герметизирующие стенки (4, 7), соединенные друг с другом для образования камеры (2) вмещения жидкого вещества (S), одно посадочное место (3), изолированное от герметизирующей камеры (2), для вмещения устройства (T) считывания температуры жидкого вещества (S). Герметизирующие стенки (4, 7) содержат две внешние стенки (4), которые образуют внешние габаритные размеры самой упаковки, опорные стенки (7), разграничивающие посадочное место (3) и выполненные с возможностью образования сквозного отверстия через герметизирующую камеру (2), которая имеет две вмещающие области (2а). Внешние стенки (4) образуют край (5), имеющий впускной зазор (6) для жидкого вещества (S). Опорные стенки имеют пару первых сторон (7а) напротив друг друга и пару вторых сторон (7b) напротив друг друга. Изобретение позволяет повысить надежность считывания температурных данных во время контроля и сертификации. 7 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, акушерству и гинекологии, и может быть использовано при необходимости сохранения и восстановления репродуктивной функции у женщин с онкологическими заболеваниями. Для этого до проведения курса лучевой и/или химиотерапии лапароскопическим доступом осуществляют забор образцов яичниковой ткани из кортикального слоя с фрагментацией их на части по 2-5 мм2. Из полученных образцов одну часть берут на гистологические исследования, а другую помещают в криопробирки и консервируют в две стадии. При этом в качестве криопротектора на первой стадии используют 10-14% раствор диметилсульфоксида, на второй стадии - 20% раствор 2,5 М сахарозы и 29-32% раствор диметилсульфоксида. При проведении аутотрансплантации образцы яичниковой ткани размораживают с использованием среды Kitazata и оценивают их качество путем гистологического исследования. Непосредственно перед трансплантацией лапароскопическим путем проводят биопсию сохраненных яичников с последующим проведением гистологического исследования. При удовлетворительном результате исследования в кортикальном слое каждого яичника формируют ложе и помещают в них от 5 до 10 фрагментированных размороженных образцов. Затем края ложа смыкают, обрабатывают биологически нейтральным клеем и накладывают клеммы для последующего визуального контроля и оценки динамики роста фолликулов трансплантированной ткани с применением визуальной диагностики. Контроль уровня гормонов проводят один раз в месяц до достижения уровня гормонов на момент забора яичниковой ткани для консервации. Способ позволяет сохранить или восстановить репродуктивную функцию у женщин с онкологическими заболеваниями за счет трансплантации декриоконсервированной овариальной ткани в сохраненные яичники, что обеспечивает адекватную васкуляризацию и приживаемость ткани. 3 з.п. ф-лы, 3 табл., 5 ил., 3 пр.

Изобретение относится к пантовому оленеводству, в частности к консервированию варочной пантовой воды непосредственно на мараловодческой ферме в период панторезной компании. Способ заключается в том, что наряду с термообработкой варочной пантовой воды в качестве консерванта используют листья бадана. Предлагаемое изобретение позволяет в период панторезной компании на мараловодческой ферме сохранять для реализации весь объем варочной пантовой воды без изменения ее органолептических характеристик. 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине. Биоткань перед ферментативной обработкой помещают в гипертонические растворы хлорида натрия и подвергают воздействию ультразвука в течение 20-300 минут. Затем обрабатывают ферментом террилитином в концентрации 0,1-10 ПЕ на 1 грамм ткани, отмывают в растворе уксусной кислоты и гидрокарбонате натрия, выдерживают в многократно заменяющихся растворах глутарового альдегида возрастающих концентраций и стерилизуют. Изобретение позволяет гарантированно сохранить коллагеново-эластическую структуру биоткани, снизить степень ее минерализации, сократить расход используемых для обработки реактивов, получить неиммуногенный, прошитый по всему объему, биоматериал. 1 з.п. ф-лы, 3 пр.

Изобретение относится к медицине. Проводят получение донорской крови, смешивание с гемоконсервантом глюцир в соотношении 4:1, разделение донорской крови на плазму и эритроцитную массу с последующим хранением эритроцитной массы в течение 30 суток при t+4°С. Дополнительно в состав гемоконсерванта вводят 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малат. Изобретение позволяет повысить эффективность защиты клеточных мембран эритроцитов, ограничить процесс гемолиза, предупредить образование микросгустков на поздних сроках хранения эритроцитарной массы. 1 з.п. ф-лы, 6 табл., 5 пр.

· Компоненты крови – лейкоцитарная и тромбоцитарная масса, фибриноген, альбумин, фибринолизин. Показания к их применению.

Глюкозоцитратный р-р: 2г цитрата кислого (стабилизатор), 3г глюкозы (консервант), 0,5г – сульфацил-натрия, 0,01г левомицетина – антибактериальные препараты.

Основные гемотрансфузионные среды: 1 – Консервированная кровь – Готовят с применением цитрат натрия, который связывает ионы кальция и предупреждает свертывание крови, 1:4. Хранят 4-6 °С. 21 день, - с целью остановки кровотечения переливают кровь со сроком хранения не более 2-3 сут, с целью иммунокоррекции - не более 5-7 сут. 2 - Свежецитратная кровь – используют 6% раствор цитрата натрия в соотношении с кровью 1:10. Такая кровь используется непосредственно после заготовки или в ближайшие часы. 3 – Гепаринизированная кровь – В качестве стабилизатора используют гепарин с глюкозой и левомицетином. хранят 4 "С.- 1 сут. Показания к компонентной трансфузии: при анемии, кровопотере, кровотечении показаны трансфузии эритроцитной массы; при лейкопении, агранулоцитозе, иммунодефииитном состоянии - лейкоцитной массы; при тромбоцитопении - тромбоцитной массы; при гиподиспротеинемии, нарушениях свертывающей системы, дефиците ОЦК - плазмы крови, альбумина, протеина. Компоненты крови – Эритроцитную массу получают из цельной крови, из которой удалено 60-65% плазмы путем отстаивания или центрифугирования. Хранят при температуре 4-6 °С. Эритроцитная взвесь в соотношении 1:1. Стабилизатором является цитрат натрия. Хранят при температуре 4-6 °С. Срок хранения - 8-15 дней. Показаниями к переливанию эритроцитных массы и взвеси служат кровотечение, острая кровопотеря, шок, заболевания системы крови, анемии и септические состояния. Отмытые и размороженные эритроциты получают путем удаления из крови лейкоцитов, тромбоцитов и белков плазмы, показания к их трансфузии: аллергические заболевания, посттрансфузионные реакции, сенсибилизация больного, сердечная, почечная недостаточность, тромбоз, эмболия. Тромбоцитную массу получают из плазмы консервированной донорской крови, хранившейся не более 1 сут, путем легкого центрифугирования. Показание – тромбоцитопении Лейкоцитная масса – Хранят во флаконах при температуре 4-6 °С не более 24 ч, показаны при лейкопенией, при агранулоцитозе, угнетении кроветворения. Плазму крови получают из цельной крови путем либо отстаивания, либо центрифугирования. Замороженную плазму хранят при температуре -25 °С в течение 90 дней, применяют с целью возмещения плазмопотери при дефиците ОЦК, шоке, для остановки кровотечения, для комплексного парентерального питания. Сухую плазму получают из замороженной в условиях вакуума. Срок хранения препарата 5 лет. Перед употреблением разводят дистиллированной водой. Препараты крови : Альбумин получают путем фракционирования плазмы. Выпускают в виде 5%, 10%, 20% растворов во флаконах вместимостью 50, 100, 250, 500 мл. Препарат обладает выраженными онкотическими свойствами, способностью удерживать воду и тем самым увеличивать ОЦК, оказывать противошоковое действие. назначают при различных видах шока, ожогах, при гипопротеинемии и гипоальбуминемии при тяжелых гнойно-воспалительных процессах. Протеин. В его состав входят альбумин (75-80%) и стабильные а- и (В-глобулины (20-25%). Показания к применению протеина те же, что и для плазмы. Криопреципитат Препарат содержит антигемофильный глобулин (VIII фактор), (XII фактор), фибриноген. Применение – нарушениями свертывающей системы крови, Протромбиновый комплекс высоким содержанием II, VII, IX, X факторов свертывающей системы крови. Применяют у больных, гемофилией. Фибриноген получают из плазмы, Применяют у больных с врожденной и приобретенной гипо- и афибриногенемией, при профузных кровотечениях. Тромбин - готовят из плазмы, в его состав входят тромбин, тромбопластин, хлорид кальция. Применяют местно для остановки капиллярного, паренхиматозного кровотечения. Из донорской крови готовят препараты иммунологического действия: Y-глобулин (противостафилококковый, противостолбнячный, противокоревой), комплексные иммунные препараты - пентаглобин, сандобулин и др.